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杂交鹅掌楸体胚发生中胚性细胞总RNA提取
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杂交鹅掌楸体胚发生中胚性细胞总RNA提取 吴淳陈金慧李婷婷施季森 林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室,南京林业大学 摘要：本实验通过比较改良SDS法、Trizol法和设计的改良CTAB法对杂交鹅掌楸体胚发生过程总RNA的提取结果,杂交鹅掌楸体胚发生过程总RNA提取最佳体系为:最佳试材的用量为0.25～0.5g,氯仿:异戊醇（24:1）抽提3次,终浓度2mol/L的LiCl与2倍体积的无水乙醇依次沉淀RNA。该体系提取的总RNA质量高,无降解,无污染。反转录后合成的cDNA第一链分子量大小分布在100～1500bp之间,可以满足下一步实验要求。并以此第一链成功进行了RT-PCR。 关键词： 杂交鹅掌楸;体细胞胚胎发生;RNA提取;反转录;RT-PCR检测; 基金资助： 教育部博士研究生基金资助项目（20040298013）； 霍英东青年教师资金（101027）共同资助； 专辑： 农业科技 专题： 林业 分类号： S792.21 |
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