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水稻品种真实性检测技术研究与优化
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作者：莫洁华 摘要：品种真实性检测是水稻新品种保护和种子生产的技术依据,也是种子管理工作中迫切需要解决的问题.小区种植鉴定法(即DUS测试)是国际公认的品种真实性鉴定方法,但因时效性差使得其应用受到一定的局限性;SSR指纹图谱法是目前是水稻品种真实性鉴定最常用的分子生物学方法,各检测机构通常采用《水稻品种鉴定技术规程SSR标记法》(NY/T1433-2007)标准进行检测,但因标准具有先天的滞后性和适用性,导致该检测技术采用的仪器设备和检测方法较为落后,并且检测速度跟不上样品量的增速.高通量,快速,准确地鉴定种子品种真实性一直是我国乃至国际种子检测领域的难点之一.通过与国内外公司的技术交流和我们在工作中总结的一些经验,用原有的标准与我们现在用的方法做比较,研究出一套通量高,准确快捷的检测技术. 一,建立了一套适合于水稻种子品种真实性快速鉴定技术体系:从标记的选择,DNA的快速提取方法的突破,PCR扩增体系的优化到电泳结果判定,经过研究,最终建立了一套适合于水稻种子品种真实性快速鉴定技术体系,该技术实现了3个突破,其一是DNA提取方法的突破,将96个品种种子DNA提取时间缩短到40 min;其次优化了PCR扩增体系,优化后的体系效率高,稳定性强;最后是优化了电泳程序,这些优化具有稳定性高,带型清晰的特点,可以满足现有的品种鉴定. 二,建立了全自动毛细管电泳鉴定水稻品种真实性技术:利用GeneMapper软件处理和分析毛细管电泳数据,减少人工读图判断,大大增加检测数据的准确性和精确性.收起 关键词：水稻 品种鉴定 SSR标记 DNA提取 毛细管电泳 |
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