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[高分] 学位论文 代谢工程改造酿酒酵母合成谷氨酸的研究
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代谢工程改造酿酒酵母合成谷氨酸的研究 霍巧娟 天津科技大学 摘要：酵母抽提物富含氨基酸、多肽、B族维生素、呈味核苷酸及微量元素,具有纯天然、味道醇厚、营养丰富等诸多优点,广泛应用于食品领域,但其鲜度不够突出(谷氨酸含量不足)。酿酒酵母是我国酵母抽提物产品的主要生产原料,通过代谢工程与合成生物学策略对酿酒酵母进行改造,可以提高酿酒酵母合成谷氨酸的能力。但是,由于酿酒酵母相较于原核生物具有更复杂的氨基酸调控机制,强化以酿酒酵母为平台的氨基酸代谢途径具有很大提升空间,所以通过代谢工程强化酿酒酵母内源氨基酸代谢路径是合成氨基酸基化合物的重要前提。本课题以酿酒酵母AY12α为出发菌株,以蔗糖为碳源,通过三酸酸循环(TCA)途径的修饰、谷氨酸合成途径的强化、跨膜转运的强化及副产物的抑制等手段提高酿酒酵母利用蔗糖合成谷氨酸。主要研究内容结果如下: 探究了增强三羧酸循环碳流量相关的6个关键基因对谷氨酸含量的影响(编码磷酸烯醇丙酮酸羧激酶基因PCK1、丙酮酸羧化酶编码基因PYC2、丙酮酸脱氢酶编码基因亚基PDA1、柠檬酸合酶基因CIT2、顺乌头酸酶基因ACO2、异柠檬酸脱氢酶基因IDP1)。分别构建了过表达PCK1、PYC2、PDA1、CIT2、ACO2和IDP1基因的... 更多 关键词： 酿酒酵母;L-谷氨酸;三羧酸循环;酵母提取物;代谢工程; 专辑： 工程科技Ⅰ辑 专题： 一般化学工业 DOI： 10.27359/d.cnki.gtqgu.2023.000476 分类号： TQ922.1 导师： 郭学武 学科专业： 轻工技术与工程 |
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