细胞基因敲除

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ooh 来自贵州，发表于：2024-12-14 19:53:48

求，细胞基因敲除使用质粒和慢病毒有什么优缺点哇

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椅子

ooh (楼主) 2024-12-16 10:42:10 发布自贵州，

Rayeden： 1.质粒敲除的优点：
操作简便：质粒敲除通常只需要简单的转染步骤，不需要复杂的病毒包装过程。
时间短：质粒敲除的实验周期通常较短，从构建到细胞转染通常只需要几天时间。
成本较低：相比慢病毒，质粒的制备和储存成本较低。
2.质粒敲除的缺点：
基因编辑效率低：质粒的转染效率通常低于慢病毒，尤其是对于一些难以转染的细胞类型。
脱靶效应：质粒敲除可能会产生脱靶效应，即Cas9酶错误地切割非目标基因。
稳定性差：质粒敲除的细胞通常不稳定，可能随着细胞分裂而丢失敲除的基因。
3.慢病毒敲除的优点：
转染效率高：慢病毒能够感染分裂和非分裂的细胞，转染效率较高。
稳定性好：慢病毒转染的细胞通常具有较长的稳定性和遗传稳定性。
基因编辑效率高：慢病毒介导的基因敲除通常具有较高的效率。
4.慢病毒敲除的缺点：
操作复杂：慢病毒需要通过包装细胞来制备，过程相对复杂，需要一定的时间和技术。
成本较高：慢病毒的制备、包装和储存成本通常高于质粒。
潜在风险：慢病毒载体可能具有潜在的生物学风险等。
总结来说，质粒敲除适合快速、低成本的小规模研究，而慢病毒敲除则更适合需要高效率、高稳定性的大规模研究或长期细胞培养实验。选择哪种方法取决于实验的具体需求和条件。

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谢谢同学！！！真的很感谢

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沙发

Rayeden 2024-12-15 10:37:34 发布自广东，

1.质粒敲除的优点：
操作简便：质粒敲除通常只需要简单的转染步骤，不需要复杂的病毒包装过程。
时间短：质粒敲除的实验周期通常较短，从构建到细胞转染通常只需要几天时间。
成本较低：相比慢病毒，质粒的制备和储存成本较低。
2.质粒敲除的缺点：
基因编辑效率低：质粒的转染效率通常低于慢病毒，尤其是对于一些难以转染的细胞类型。
脱靶效应：质粒敲除可能会产生脱靶效应，即Cas9酶错误地切割非目标基因。
稳定性差：质粒敲除的细胞通常不稳定，可能随着细胞分裂而丢失敲除的基因。
3.慢病毒敲除的优点：
转染效率高：慢病毒能够感染分裂和非分裂的细胞，转染效率较高。
稳定性好：慢病毒转染的细胞通常具有较长的稳定性和遗传稳定性。
基因编辑效率高：慢病毒介导的基因敲除通常具有较高的效率。
4.慢病毒敲除的缺点：
操作复杂：慢病毒需要通过包装细胞来制备，过程相对复杂，需要一定的时间和技术。
成本较高：慢病毒的制备、包装和储存成本通常高于质粒。
潜在风险：慢病毒载体可能具有潜在的生物学风险等。
总结来说，质粒敲除适合快速、低成本的小规模研究，而慢病毒敲除则更适合需要高效率、高稳定性的大规模研究或长期细胞培养实验。选择哪种方法取决于实验的具体需求和条件。

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