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甘油感受态会导致潮霉素B抗性嘛?

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玉子卿
玉子卿 来自贵州 发表于:2023-02-23 12:00:22

事情是这样的,我在做电转化过程中需要用甘油洗菌做感受态,但是目前遇到一个问题,就是这株菌在做感受态前是没有潮霉素B抗性的,但是在做完感受态后具有了潮霉素B抗性,可以排除抗生素失效,都是现配现用,涂过别的菌不长;也可以排除实验过程污染,因为两个人不同环境,不同时间点,不同菌做得到了一样的结果,另外也不是电转杯污染,因为没电转只是做了感受态就忽然有抗性了。想请教一下各位研友,有人出现类似情况或者还有可能是别的原因导致的吗?另外,我还查了一下潮霉素B的杀菌原理,是通过诱导80S核糖体错识干扰蛋白合成杀菌。


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回帖
  • 玉子卿
    椅子
    玉子卿 (楼主) 2023-02-25 00:07:41 发布自贵州
    在水一方出现这种情况可能是由于以下原因:
    1. 感受态过程中使用的甘油或其他试剂中存在有机物质,这些有机物质可能会导致菌体发生突变,从而获得抗性。
    2. 感受态过程中的电场强度过高,可能会导致菌体DNA的损伤和突变,从而获得抗性。
    3. 感受态后细胞生长状态不佳,可能会导致菌体产生抗性,因为在不适宜的生长条件下,菌体会通过突变来适应环境。
    4. 感受态后的细胞可能存在遗传测序或克隆污染,导致出现异常结果。

    对于这个问题,建议您可以尝试以下方法:
    1. 在感受态过程中使用纯度更高的试剂,减少可能存在的有机物质。
    2. 调整电场强度,避免过高的电场强度对菌体造成损伤。
    3. 确保感受态后细胞的生长状态良好,使用适宜的培养条件。
    4. 进一步检查遗传测序或克隆污染的可能性,确保实验结果的准确性。
    好的,非常感谢,我去试试
  • 在水一方
    沙发
    在水一方 站长 2023-02-23 16:53:41 发布自乌克兰
    出现这种情况可能是由于以下原因:
    1. 感受态过程中使用的甘油或其他试剂中存在有机物质,这些有机物质可能会导致菌体发生突变,从而获得抗性。
    2. 感受态过程中的电场强度过高,可能会导致菌体DNA的损伤和突变,从而获得抗性。
    3. 感受态后细胞生长状态不佳,可能会导致菌体产生抗性,因为在不适宜的生长条件下,菌体会通过突变来适应环境。
    4. 感受态后的细胞可能存在遗传测序或克隆污染,导致出现异常结果。

    对于这个问题,建议您可以尝试以下方法:
    1. 在感受态过程中使用纯度更高的试剂,减少可能存在的有机物质。
    2. 调整电场强度,避免过高的电场强度对菌体造成损伤。
    3. 确保感受态后细胞的生长状态良好,使用适宜的培养条件。
    4. 进一步检查遗传测序或克隆污染的可能性,确保实验结果的准确性。
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