Development of the Low-Temperature Inducible System for Recombinant Protein Production in Escherichia coli Nissle 1917

大肠杆菌 重组DNA 微生物学 化学 生物 生物化学 基因
作者
Tzu-Han Lin,Shu‐Yun Cheng,Lin Yifen,Po‐Ting Chen
出处
期刊:Journal of Agricultural and Food Chemistry [American Chemical Society]
卷期号:72 (13): 7318-7325 被引量:3
标识
DOI:10.1021/acs.jafc.4c01075
摘要

The pET system is commonly used for producing foreign proteins in Escherichia coli, but its reliance on the costly and metabolically demanding inducer IPTG limits its industrial use. This study engineered a low-temperature inducible system (LTIS) in E. coli Nissle 1917 (EcN) by combining the T7 expression system with the thermal inducible mechanism CI857-λPRPL to generate the new LTIS strain, ENL7P. The strain ENL7P-sfGFP-Km underwent overnight culture at 37 °C for 14–16 h, followed by subculturing at 30 °C for 24 h. This resulted in a notable 5.53-fold increase in the sfGFP induction rate when the strain was cultivated under 37–30 °C conditions. Moreover, gene expression was induced using a two-stage strategy. Initially, the strain was cultured overnight at 39 °C for 14–16 h, followed by a subculture at 30 °C for 6 h, and finally, another subculture at 30 °C for 24 h. This cultivation strategy led to an impressive 158.37-fold induction rate for sfGFP. Similar effects could be achieved through utilization of the LTIS system for inducing the production of thermophilic trehalose synthase from Thermus antranikianii (TaTS). The results of this study proved that the LTIS system has the potential for industrial applications.
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