Construction of a Large Naïve Human Phage-Displayed Fab Library Through One-Step Cloning

平移(音频) 噬菌体展示 计算生物学 抗体 克隆(编程) 双特异性抗体 计算机科学 生物 遗传学 单克隆抗体 古生物学 缩放 程序设计语言 镜头(地质)
作者
Zhongyu Zhu,Dimiter S. Dimitrov
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 129-142 被引量:52
标识
DOI:10.1007/978-1-59745-554-1_6
摘要

Antibody-based therapeutics is attracting more attention in the post-genome era, in contrast to a diminution in the initial high expectation for rapid development of gene-based therapeutic modalities. In support to the antibody-based therapeutics, the advent of recent technologies has made human antibody screening and production progressively more economic. Among those technologies, phage-display antibody library has been successfully applied in the antibody-based drug development both as fully human antibody sources and tools for antibody engineering. Building up a high-quality antibody library with a large library size and high diversity has been crucial for successful isolation of antibodies. Here we describe an efficient strategy for the construction of a large naïve phage-display human Fab library with one-step cloning. Optimization of each key step is extensively discussed and simplified protocols for library panning and Fab production are also described.

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