Capillary Zone Electrophoresis Method for a Highly Glycosylated and Sialylated Recombinant Protein: Development, Characterization and Application for Process Development

化学 等电聚焦 毛细管电泳 色谱法 唾液酸 糖蛋白 基因亚型 重组DNA 过程开发 电泳 等电点 生物化学 基因 业务 过程管理
作者
Le Zhang,Ken Lawson,Bernice Yeung,Jette Wypych
出处
期刊:Analytical Chemistry [American Chemical Society]
卷期号:87 (1): 470-476 被引量:13
标识
DOI:10.1021/ac504187v
摘要

A purity method based on capillary zone electrophoresis (CZE) has been developed for the separation of isoforms of a highly glycosylated protein. The separation was found to be driven by the number of sialic acids attached to each isoform. The method has been characterized using orthogonal assays and shown to have excellent specificity, precision and accuracy. We have demonstrated the CZE method is a useful in-process assay to support cell culture and purification development of this glycoprotein. Compared to isoelectric focusing (IEF), the CZE method provides more quantitative results and higher sample throughput with excellent accuracy, qualities that are required for process development. In addition, the CZE method has been applied in the stability testing of purified glycoprotein samples.
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