Preparation, Administration, and Assessment of In vivo Tissue-Specific Cellular Uptake of Fluorescent Dye-Labeled Liposomes

脂质体 体内 流式细胞术 细胞 化学 细胞内 生物物理学 细胞生物学 生物 分子生物学 生物化学 生物技术
作者
Victoria Osinski,Alexander L. Klibanov,Coleen A. McNamara
出处
期刊:Journal of Visualized Experiments [MyJoVE Corporation]
卷期号: (161) 被引量:3
标识
DOI:10.3791/61585
摘要

There is a growing interest in using liposomes to deliver compounds in vivo particularly for targeted treatment approaches. Depending on the liposome formulation, liposomes may be preferentially taken up by different cell types in the body. This may influence the efficacy of the therapeutic particle as progression of different diseases is tissue- and cell-type-specific. In this protocol, we present one method for synthesizing and fluorescently labeling liposomes using DSPC, cholesterol, and PEG-2000 DSPE and the lipid dye DiD as a fluorescent label. This protocol also presents an approach for delivering liposomes in vivo and assessing cell-specific uptake of liposomes using flow cytometry. This approach can be used to determine the types of cells that take up liposomes and quantify the distribution and proportion of liposome-uptake across cell types and tissues. While not mentioned in this protocol, additional assays such as immunofluorescence and single-cell fluorescence imaging on a cytometer will strengthen any findings or conclusions made as they permit assessment of intracellular staining. Protocols may also need to be adapted depending on the tissue(s) of interest.

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