In Vitro Diagnosis and Visualization of Cerebral Ischemia/Reperfusion Injury in Rats and Protective Effects of Ferulic Acid by Raman Biospectroscopy and Machine Learning

阿魏酸 缺血 体外 药理学 医学 化学 神经科学 生物化学 麻醉 内科学 生物
作者
Mingying Liu,Ju Mu,Wan Gong,Kena Zhang,Maoyun Yuan,Yizhi Song,Bei Li,Naifu Jin,Wenjing Zhang,Dayi Zhang
出处
期刊:ACS Chemical Neuroscience [American Chemical Society]
卷期号:14 (1): 159-169 被引量:7
标识
DOI:10.1021/acschemneuro.2c00612
摘要

Ischemic stroke is a major cause of mortality with complicated pathophysiological mechanisms, and hematoxylin and eosin (HE) staining is a histochemical diagnosis technique heavily relying on subjective observation. In this study, we developed a noninvasive assay using Raman spectroscopy for in vitro diagnosis and visualization of cerebral ischemia/reperfusion injury and protective effects of ferulic acid. By establishing a middle cerebral artery occlusion (MCAO) model in Sprague-Dawley male rats, we found effective interventions by ferulic acid using the neurological function score and HE staining. Raman spectra of neuronal and neuroglial cells exhibited significant intensity changes of protein, nucleotide, lipid, and carbohydrate at 780, 814, 1002, 1012, 1176, 1224, 1402, 1520, 1586, 1614, and 1752 cm–1. Cluster vector analysis highlighted the alterations at 1002, 1080, 1298, 1430, 1478, 1508, 1586, and 1676 cm–1. To evaluate the levels of neuron injury and intervention performance, a random forest model was developed on Raman spectral data and achieved satisfactory accuracy (0.9846), sensitivity (0.9679–0.9932), and specificity (0.9945–0.9989), ranking peaks around 1002 cm–1 as key fingerprint for classification. Spectral phenylalanine-to-tryptophan ratio was the biomarker to visualize neuronal injury and intervention performance of ferulic acid with a resolution of 1 μm. Our results unravel the biochemical changes in neuronal cells with cerebral ischemia/reperfusion injury and ferulic acid treatment, and prove Raman spectroscopy coupled with machine learning as a power tool to classify neuron viability and evaluate the intervention performance in pharmacological research.
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