Evaluation of the Skin Moisturizing Efficacy of a Collagen Peptide Isolated from Fish Scales, Using HaCaT Keratinocytes

최근 어류의 비늘에서 분리한 콜라겐으로부터 곰팡이 유래 protease 처리를 통해 Gly-Pro 디펩타이드를 주요 성분으로 하는 저분자 콜라겐 펩타이드 NS(CPNS)가 개발되었다. 선행연구를 통해 자외선으로 광노화가 유발된 hairless mouse 모델에서 12주간의 CPNS 투여는 주름생성 억제 및 보습 증진 활성 등의 피부 손상 개선 효과를 보여주었는데, 본 연구에서는 HaCaT keratinocyte를 이용하여 CPNS가 피부 보습 인자인 hyaluronic acid(HA) 생성 및 HA 합성에 관여하는 세포 내 유전자 및 단백질 발현에 미치는 영향을 확인하고자 하였다. CPNS는 HaCaT 세포에 독성을 나타내지 않았으며, 31.3~500 μg/mL의 범위에서 HA 생성을 농도의존적인 경향으로 증가시켰다. Real-time PCR 분석을 통해 CPNS 처리는 HA 합성에 중요한 역할을 담당하는 hyaluronic synthase 2(HAS2) 유전자를 농도 및 시간 의존적인 경향으로 증가시키는 반면, HA 분해에 관여하는 hyaluronidase 1(HYAL1) 유전자는 시간 의존적인 경향으로 감소시키는 것으로 나타났다. 이들 효소의 세포 내 생성량을 western blotting을 통해 확인한 결과, CPNS의 처리는 농도 및 시간 의존적인 경향으로 HAS2를 증가시키는 동시에 HYAL1 감소를 유도하는 것으로 확인되었다. 결론적으로 CPNS는 HaCaT 세포 내의 HAS2 증가/HYAL1 감소 기작을 통해 보습인자인 HA의 생산을 증진하는 것으로 확인되었으며, 본 연구 결과를 통해 CPNS의 보습 증진 기능성 소재로서의 활용에 기초자료로 이용될 수 있을 것으로 사료되었다.