Establishment of a UPLC-MS method for quantitative analysis of tryptophan-kynurenine metabolism in IBS-D model rats

化学 犬尿氨酸 色氨酸 色氨酸代谢 犬尿氨酸途径 定量分析(化学) 色谱法 新陈代谢 吲哚胺2,3-双加氧酶 高效液相色谱法 药理学 生物化学 氨基酸 医学
作者
Qin Lu,Huifei Yang,Siqi Feng,Xiangyu Xie,Shan Liu,He Zhu,Zhiqiang Su,Yingchun Zhou,Hongmei Tang
出处
期刊:Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis [Elsevier]
卷期号:251: 116426-116426
标识
DOI:10.1016/j.jpba.2024.116426
摘要

Background and Aims Abnormalities in tryptophan (TRP) metabolism induce abdominal pain and intestinal motility disorders. The study of TRP metabolism in diarrhea-predominant-irritable bowel syndrome (IBS-D) is important for the prevention, diagnosis, and treatment of this disease. In this study, a rapid and reliable ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry (UPLC-MS) method was established to quantify tryptophan-kynurenine (TRP-Kyn) metabolism in the colon of a rat model with IBS-D. Methods The proteins were precipitated by methanol, chromatographically separated on a Welch Ultimate® Polar RP column with a gradient elution for 12 min, and detected by high-resolution tandem mass spectrometry. Pure water were used as an alternative mechanism for standard calibration, and the stable structural analog 2-Cl-Phe was used as an internal standard. Results Within a certain range, the r of TRP, kynurenine (Kyn) and quinolinic acid (QA), kynurenic acid (KA) are greater than 0.99, were found to be accurate and precise. The metabolism of TRP was significantly up-regulated along the Kyn pathway in the IBS-D model rats and normalized after treatment with pivacurium bromide. Conclusion This study investigates the mechanisms of IBS-D gastrointestinal dysfunction from the perspective of colonic TRP metabolism, and also provides new directions for the diagnosis and therapeutic approach of this disease.
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