High-resolution melting for detecting KRAS mutations in colorectal cancer

克拉斯 高分辨率熔体 结直肠癌 一致性 外显子 癌症 癌基因 癌症研究 腺癌 突变 内科学 生物 肿瘤科 医学 基因 聚合酶链反应 遗传学 细胞周期
作者
Raelson Rodrigues Miranda,Tiago Donizetti Silva,Nora Manoukian Forones
出处
期刊:Biomedical Reports [Spandidos Publishing]
标识
DOI:10.3892/br.2019.1254
摘要

Colorectal cancer is a leading cause of cancer that may metastasize. KRAS gene sequence of exon 2 should be examined for identification of patients that can be treated with anti-EGFR. The aim of the present study was to evaluate the efficacy of high-resolution melting (HRM) to detect KRAS mutations in colorectal cancer (CRC) tumors. The exon 2 of KRAS was amplified from 47 adenocarcinoma CRC tissues. The tumors were subjected to high-resolution melt using quantitative PCR to identify wild‑type and mutant subgroups. The results were compared to the mutations detected by next‑generation sequences (NGS). The study included 47 patients, with a mean age of 62 years, of whom 24 patients were male. Most of the patients had stage II or stage III tumors. The mean melting temperatures for the wild-type and mutated group at exon 2 were 78.13˚C and 77.28˚C, respectively (P<0.001, 95% CI = 0.11‑0.4). The sensitivity and specificity of high‑resolution melting were 83.3 and 96.6%, respectively, with a high concordance between the NGS and HRM methods for detecting KRAS mutation in exon 2 (ĸ = 0.816; P=0.625). Thus, HRM could be used as an alternative method for detecting KRAS mutations in colorectal cancer tissue.
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