PEM-seq comprehensively quantifies DNA repair outcomes during gene-editing and DSB repair

DNA修复 基因组编辑 DNA 底漆(化妆品) 基因 计算生物学 生物 基因组 DNA测序 遗传学 计算机科学 化学 有机化学
作者
Yang Liu,Jianhang Yin,Tingting Gan,Mengzhu Liu,Changchang Xin,Weiwei Zhang,Jiazhi Hu
出处
期刊:STAR protocols [Elsevier BV]
卷期号:3 (1): 101088-101088 被引量:17
标识
DOI:10.1016/j.xpro.2021.101088
摘要

The repair products of double-stranded DNA breaks (DSBs) are crucial for investigating the mechanism underlying DNA damage repair as well as evaluating the safety and efficiency of gene-editing; however, a comprehensively quantitative assay remains to be established. Here, we describe the step-by-step instructions of the primer extension-mediated sequencing (PEM-seq), followed by the framework of data processing and statistical analysis. PEM-seq presents a full spectrum of repair outcomes for both genome-editing-induced and endogenous DSBs in mouse and human cells. For complete details on the use and execution of this profile, please refer to Gan et al. (2021), Yin et al. (2019), Liu et al. (2021a), and Zhang et al. (2021).
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