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GST-SUMO-MT融合蛋白在大肠杆菌中的自诱导表达
化学
作者
彭冬,
杨威,
Zhao Wang,
王席,
柳忠玉
出处
期刊:生物技术通报
日期:2016-02-24
卷期号:32 (2): 219-224
链接
aiijournal.com
doi.org
标识
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.02.030
摘要
旨在考察在大肠杆菌中自诱导表达GST-SUMO-MT融合蛋白的可行性,并对自诱导培养条件及培养基成分进行优化,以提高蛋白产量。采用摇瓶培养,利用单因素和正交实验对工程菌自诱导的培养条件(诱导时间、诱导温度)和培养基组分(蛋白胨、酵母粉、甘油、葡萄糖、乳糖)进行优化,检测菌体浓度、可溶性目的蛋白的表达量。结果表明,自诱导培养基碳氮源的最优配比为:2%蛋白胨、2%酵母粉、0.3%甘油、0.05%葡萄糖和0.3%乳糖。重组菌自诱导表达最优发酵条件为:采用两阶段温度控制,37℃培养3 h,25℃继续培养13 h。此时可溶性目的蛋白的表达量和菌体浓度分别为LB培养基(IPTG诱导)的2.2倍和2.3倍。
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