Improved Simple Sample Pretreatment Method for Quantitation of Major Human Milk Oligosaccharides Using Ultrahigh Pressure Liquid Chromatography with Fluorescence Detection

色谱法 超滤(肾) 化学 低聚糖 离心 高效液相色谱法 荧光 基质(化学分析) 荧光标记 生物化学 物理 量子力学
作者
Xunwen Huang,Baoli Zhu,Tiemin Jiang,Chunying Yang,Weicang Qiao,Juncai Hou,Yanhui Han,Hang Xiao,Lijun Chen
出处
期刊:Journal of Agricultural and Food Chemistry [American Chemical Society]
卷期号:67 (44): 12237-12244 被引量:25
标识
DOI:10.1021/acs.jafc.9b03445
摘要

Human milk oligosaccharides (HMOs) maintain and promote infant health. Most of the current methods for HMOs quantitation require labor-intensive and time-consuming steps for sample preparation. This study presents two very simple and easy-to-operate pretreatment methods, requiring either ultrafiltration or centrifugation to separate free oligosaccharides from whole fat human milk and other milk matrix before oligosaccharides labeling for quantifying HMOs using ultrahigh pressure liquid chromatography with fluorescence detection. A single chromatography run quantified 15 sialylated and neutral HMOs with high sensitivity (with an LOD less than 8 pg for all HMOs tested: about 1 pg for 2'-fucosyllactose, 3-fucosyllactose, 4'-galactosyllactose, 3'-galactosyllactose, and 6'-galactosyllactose) and good linearity with coefficient of correlation above 0.999. Accuracy and precision were satisfactory for both pretreatment methods. Overall, the centrifugation pretreatment was efficient and reliable for samples with high levels of oligosaccharides, and the ultrafiltration pretreatment was especially suitable for samples with low oligosaccharide abundance.
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