Development and evaluation of a VP1-ELISA for detection of antibodies to duck hepatitis type 1 virus

生物 多克隆抗体 病毒学 抗体 病毒 打开阅读框 大肠杆菌 融合蛋白 污渍 分子生物学 基因 重组DNA 肽序列 遗传学
作者
Ming Liu,Tingting Zhang,Yun Zhang,Fanyi Meng,Xiaojun Li,Hou Zhen-zhong,Feng Xin-chang,Xiangang Kong
出处
期刊:Journal of Virological Methods [Elsevier BV]
卷期号:169 (1): 66-69 被引量:23
标识
DOI:10.1016/j.jviromet.2010.06.018
摘要

The VP1-encoding gene of the duck hepatitis type 1 virus (DHV-1) HP-1 strain was cloned and expressed in Escherichia coli. The open reading frame (ORF) of VP1 comprised 714 bp and encoded 238 amino acids, with a predicated molecular mass of 26.5 kDa. The expressed VP1 fusion protein in E. coli was detected by Western blotting with duck anti-DHV-1 polyclonal serum. A VP1-ELISA using the expressed VP1 protein as a coating antigen for the detection of antibodies to DHV-1 in ducks was developed. In comparison with the virus neutralization test, the specificity and sensitivity of the VP1-ELISA was 92.5% and 96.7%. Comparative analysis between Western blots and the VP1-ELISA showed that the concordance between the two methods was 86%. The VP1-ELISA did not react with the anti-sera to other duck viral pathogens, implying that this protein is specific for the recognition of duck anti-DHV-1 antibodies. Taken together, the VP1-ELISA is a highly sensitive and specific test that could be used for screening for DHV-1 infection and monitoring antibody titres against DHV-1.

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