The Membrane Dynamics of Pexophagy Are Influenced by Sar1p inPichia pastoris

液泡 生物 内质网 鸟苷 细胞生物学 毕赤酵母 自噬 过氧化物酶体 生物化学 突变体 细胞器 细胞质 重组DNA 受体 基因 细胞凋亡
作者
Laura Schröder,Michael V. Ortiz,William A. Dunn
出处
期刊:Molecular Biology of the Cell [American Society for Cell Biology]
卷期号:19 (11): 4888-4899 被引量:15
标识
DOI:10.1091/mbc.e07-09-0868
摘要

Several Sec proteins including a guanosine diphosphate/guanosine triphosphate exchange factor for Sar1p have been implicated in autophagy. In this study, we investigated the role of Sar1p in pexophagy by expressing dominant-negative mutant forms of Sar1p in Pichia pastoris. When expressing sar1pT34N or sar1pH79G, starvation-induced autophagy, glucose-induced micropexophagy, and ethanol-induced macropexophagy are dramatically suppressed. These Sar1p mutants did not affect the initiation or expansion of the sequestering membranes nor the trafficking of Atg11p and Atg9p to these membranes during micropexophagy. However, the lipidation of Atg8p and assembly of the micropexophagic membrane apparatus, which are essential to complete the incorporation of the peroxisomes into the degradative vacuole, were inhibited when either Sar1p mutant protein was expressed. During macropexophagy, the expression of sar1pT34N inhibited the formation of the pexophagosome, whereas sar1pH79G suppressed the delivery of the peroxisome from the pexophagosome to the vacuole. The pexophagosome contained Atg8p in wild-type cells, but in cells expressing sar1pH79G these organelles contain both Atg8p and endoplasmic reticulum components as visualized by DsRFP-HDEL. Our results demonstrate key roles for Sar1p in both micro- and macropexophagy.
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