Establishment of CRISPR/Cas9-based knock-in in a hemimetabolous insect: targeted gene tagging in the cricket Gryllus bimaculatus

双斑蟋蟀 生物 黑腹果蝇 基因组编辑 清脆的 板球 田板球 遗传学 Cas9 基因组 基因 丘比特露西莉亚 基因敲除 昆虫 进化生物学 计算生物学 幼虫 动物 生态学 丽蝇科
作者
Yuji Matsuoka,Taro Nakamura,Takahito Watanabe,Austen A. Barnett,Sayuri Tomonari,Guillem Ylla,Carrie A. Whittle,Sumihare Noji,Taro Mito,Cassandra G. Extavour
出处
期刊:Development [The Company of Biologists]
被引量:1
标识
DOI:10.1242/dev.199746
摘要

Studies of traditional model organisms like the fruit fly Drosophila melanogaster have contributed immensely to our understanding of the genetic basis of developmental processes. However, the generalizability of these findings cannot be confirmed without functional genetic analyses in additional organisms. Direct genome editing using targeted nucleases has the potential to transform hitherto poorly-understood organisms into viable laboratory organisms for functional genetic study. To this end, here we present a method to induce targeted genome knock-out and knock-in of desired sequences in an insect that serves as an informative contrast to Drosophila, the cricket Gryllus bimaculatus. The efficiency of germ line transmission of induced mutations is comparable to that reported for other well-studied laboratory organisms, and knock-ins targeting introns yield viable, fertile animals in which knock-in events are directly detectable by visualization of a fluorescent marker in the expression pattern of the targeted gene. Combined with the recently assembled and annotated genome of this cricket, this knock-in/knock-out method increases the viability of G. bimaculatus as a tractable system for functional genetics in a basally branching insect.
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