Direct measurement of high-density lipoprotein cholesterol in serum with polyethylene glycol-modified enzymes and sulfated alpha-cyclodextrin

聚乙二醇 环糊精 阿尔法(金融) 化学 硫酸化 胆固醇 色谱法 高密度脂蛋白 生物化学 医学 外科 结构效度 患者满意度
作者
Hiroyuki Sugiuchi,Yukitaka Uji,Hiroaki Okabe,Tetsumi Irie,Kaneto Uekama,Norihiko Kayahara,Kazuhito Miyauchi
出处
期刊:Clinical Chemistry [American Association for Clinical Chemistry]
卷期号:41 (5): 717-723 被引量:466
标识
DOI:10.1093/clinchem/41.5.717
摘要

We have developed an automated method for measuring high-density lipoprotein (HDL)-cholesterol in serum without prior separation, using polyethylene glycol (PEG)-modified enzymes and sulfated alpha-cyclodextrin. When cholesterol esterase and cholesterol oxidase enzymes were modified with PEG, they showed selective catalytic activities towards lipoprotein fractions, with the reactivity increasing in the order: low-density lipoprotein < very-low-density lipoprotein approximately chylomicron < HDL. In the presence of magnesium ions, alpha-cyclodextrin sulfate reduced the reactivity of cholesterol, especially in chylomicrons and very-low-density lipoprotein, without the need for precipitation of those lipoprotein fractions. The combination of PEG-modified enzymes with alpha-cyclodextrin sulfate provided selectivity for the determination of HDL-cholesterol in serum in the presence of a small amount of dextran sulfate without the need for precipitation of lipoprotein aggregates. The results of the HDL-cholesterol assayed in serum by this direct method correlated well with those obtained by precipitation-based methods and also that by an ultracentrifugation method.
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