Simultaneous detection of CaMV35S and T-nos utilizing CRISPR/Cas12a and Cas13a with multiplex-PCR (MPT-Cas12a/13a)

多路复用 多重聚合酶链反应 清脆的 生物 检出限 计算生物学 聚合酶链反应 化学 遗传学 色谱法 基因
作者
Gaihua Cao,Jiangbo Dong,Xiaolong Chen,Peng Lu,Yifan Xiong,Lan Peng,Jiawei Li,Danqun Huo,Changjun Hou
出处
期刊:Chemical Communications [Royal Society of Chemistry]
卷期号:58 (43): 6328-6331 被引量:30
标识
DOI:10.1039/d2cc01300b
摘要

Here, we established a strategy (MPT-Cas12a/13a) that combined CRISPR/Cas12a and Cas13a for simultaneously detecting CaMV35S and T-nos based on multiplex PCR (M-PCR) and transcription. It realized a simultaneous detection mode with different signals in the same space. The MPT-Cas12a/13a had excellent sensitivity with the limit of detection as low as 11 copies of T-nos and 13 copies of CaMV35S and it had outstanding specificity and anti-interference ability in actual sample analysis. Therefore, it is a potential candidate in the detection of GM crops.
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