A One-Step Process for the Construction of Phage Display scFv and VHH Libraries

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作者
Carolin Sellmann,Lukas Pekar,Christina Bauer,Elke Ciesielski,Simon Krah,Stefan Becker,Lars Toleikis,Jonas Kügler,André Frenzel,Bernhard Valldorf,Michael Hust,Stefan Zielonka
出处
期刊:Molecular Biotechnology [Springer Nature]
卷期号:62 (4): 228-239 被引量:19
标识
DOI:10.1007/s12033-020-00236-0
摘要

In this work we present a one-step cloning approach for the establishment of antibody phage display libraries relying on type IIs restriction enzymes. We show that single chain variable fragment (scFv) libraries with adequate qualities can readily be cloned in a 'scar-less' manner and that the isolation of antigen-specific antibodies from immunized chickens is feasible within three selection rounds. Moreover, we demonstrate the general applicability of this method by rapidly constructing and panning VHH single domain antibody phage display libraries from immunized Llama repertoires.
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