Assessment of a method of isolation, purification, and cultivation of rat liver sinusoidal endothelial cells.

Percoll公司 人口 电子显微镜 灌注 扫描电子显微镜 胶原酶 化学 分子生物学 细胞培养 生物 色谱法 生物化学 生物医学工程 离心 体外 医学 材料科学 内科学 物理 光学 复合材料 环境卫生 遗传学
作者
Filip Braet,De Zanger R,Tetsu Sasaoki,Marijke Baekeland,Peter P. M. Janssens,Bård Smedsrød,Eduard Wisse
出处
期刊:PubMed 卷期号:70 (6): 944-52 被引量:87
链接
标识
摘要

Background This paper describes a simple, low cost, and rapid method for the isolation, purification, and cultivation of rat liver sinusoidal endothelial cells (LEC). With regard to the purity, morphology, and responsiveness of the LEC, a detailed electron microscopy study was performed. In addition, we developed a method of automatic detection and analysis of the endothelial fenestrations using digitized scanning electron microscope images, allowing us to collect large sets of data. Experimental design LEC were isolated by collagenase perfusion of the liver, isopycnic sedimentation in a two-step Percoll gradient, and selective adherence. The purification and cultivation of LEC was evaluated by light and electron microscopy. The addition of ethanol to LEC cultures showed responsiveness of LEC. Results Purity and viability of LEC after selective adherence was 73.7 +/- 5.8% and > or = 95%, respectively. LEC purity was further enhanced during adherence and spreading on collagen (type I, III). After 8 hours of culture, LEC monolayers were contaminated with less than 5% of other cells. After treatment with ethanol for 90 minutes, the diameters of LEC fenestrae increased approximately 10%. Conclusions LEC isolated by this method provide a vital and responsive cell population enabling the study of structure and function of these cells in vitro. This method, in combination with a computer-assisted, on-line image analysis allows the acquisition of large numbers of measurements on these cells with high accuracy and with a minimum of bias.

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
单薄天亦完成签到,获得积分10
刚刚
yeape完成签到,获得积分10
1秒前
2秒前
细胞呵呵完成签到,获得积分10
3秒前
ydl0413发布了新的文献求助10
5秒前
风之微光完成签到,获得积分10
6秒前
6秒前
Ryan完成签到,获得积分10
9秒前
10秒前
背带裤打篮球完成签到,获得积分0
12秒前
幼萱完成签到,获得积分10
13秒前
轩辕一笑完成签到,获得积分10
16秒前
娜na完成签到 ,获得积分10
17秒前
17秒前
子焱完成签到 ,获得积分10
17秒前
Akim应助一个小胖子采纳,获得10
18秒前
hahaha完成签到 ,获得积分10
18秒前
heisa完成签到,获得积分10
21秒前
22秒前
丘比特应助爱微笑的树懒采纳,获得10
23秒前
乐观小蕊发布了新的文献求助10
27秒前
开心的QQ熊完成签到,获得积分10
27秒前
慧海拾穗完成签到 ,获得积分10
29秒前
destiny完成签到 ,获得积分10
29秒前
31秒前
缓慢白曼完成签到 ,获得积分10
32秒前
小燚完成签到 ,获得积分10
34秒前
蜂蜜完成签到,获得积分10
36秒前
王旭东完成签到 ,获得积分10
37秒前
文安完成签到,获得积分10
38秒前
苗槐完成签到,获得积分10
40秒前
领导范儿应助Leo采纳,获得10
42秒前
清新的音响完成签到 ,获得积分10
43秒前
小敏完成签到,获得积分10
46秒前
小Q含完成签到,获得积分10
48秒前
缥缈的初阳完成签到,获得积分10
49秒前
KKLD完成签到,获得积分10
50秒前
中华牌老阿姨完成签到,获得积分10
51秒前
琪琪完成签到 ,获得积分10
53秒前
闫132完成签到,获得积分10
54秒前
高分求助中
The late Devonian Standard Conodont Zonation 2000
Nickel superalloy market size, share, growth, trends, and forecast 2023-2030 2000
The Lali Section: An Excellent Reference Section for Upper - Devonian in South China 1500
Smart but Scattered: The Revolutionary Executive Skills Approach to Helping Kids Reach Their Potential (第二版) 1000
Very-high-order BVD Schemes Using β-variable THINC Method 850
Mantiden: Faszinierende Lauerjäger Faszinierende Lauerjäger 800
PraxisRatgeber: Mantiden: Faszinierende Lauerjäger 800
热门求助领域 (近24小时)
化学 医学 生物 材料科学 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 基因 遗传学 催化作用 物理化学 免疫学 量子力学 细胞生物学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3248882
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2892264
关于积分的说明 8270377
捐赠科研通 2560550
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1389097
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 651004
邀请新用户注册赠送积分活动 627850