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Light-Sheet Imaging to Reveal Cardiac Structure in Rodent Hearts

薄层荧光显微镜 图像拼接 计算机科学 人工智能 生物医学工程 心脏细胞 显微镜 反褶积 计算机视觉 光学(聚焦) 计算生物学 生物 医学 病理 光学 物理 细胞生物学 心肌细胞 算法 扫描共焦电子显微镜
作者
Milad Almasian,Alireza Saberigarakani,Xinyuan Zhang,Brian Lee,Yichen Ding
出处
期刊:Journal of Visualized Experiments [MyJOVE]
卷期号: (205)
标识
DOI:10.3791/66707
摘要

Light-sheet microscopy (LSM) plays a pivotal role in comprehending the intricate three-dimensional (3D) structure of the heart, providing crucial insights into fundamental cardiac physiology and pathologic responses. We hereby delve into the development and implementation of the LSM technique to elucidate the micro-architecture of the heart in mouse models. The methodology integrates a customized LSM system with tissue clearing techniques, mitigating light scattering within cardiac tissues for volumetric imaging. The combination of conventional LSM with image stitching and multiview deconvolution approaches allows for the capture of the entire heart. To address the inherent trade-off between axial resolution and field of view (FOV), we further introduce an axially swept light-sheet microscopy (ASLM) method to minimize out-of-focus light and uniformly illuminate the heart across the propagation direction. In the meanwhile, tissue clearing methods such as iDISCO enhance light penetration, facilitating the visualization of deep structures and ensuring a comprehensive examination of the myocardium throughout the entire heart. The combination of the proposed LSM and tissue clearing methods presents a promising platform for researchers in resolving cardiac structures in rodent hearts, holding great potential for the understanding of cardiac morphogenesis and remodeling.

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