RNAscope for VEGF-A Detection in Human Tumor Bioptic Specimens

血管生成 血管内皮生长因子 原位杂交 癌症研究 血管内皮生长因子受体 医学 病理 生物 信使核糖核酸 基因 生物化学
作者
Tiziana Annese,Roberto Tamma,Doménico Ribatti
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 143-155 被引量:1
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-2217-9_10
摘要

Different pro-angiogenic factors, such as vascular endothelial growth factor-A (VEGF-A), have been related to microvascular density, clinicopathologic factors, and poor prognosis in many tumors. VEGF-A binds its receptor 2 (VEGFR2) to induce neo-angiogenesis, a constant hallmark of tumor initiation and progression. Based on VEGF-A/VEGFR2 relevance in tumor angiogenesis, several inhibitors were developed. However, the clinical benefits of anti-angiogenic therapies are limited because tumors activate different mechanisms of drug resistance.The need for understanding tumor biology, limitation or failure of anti-angiogenic therapies, and the demand for a personalized therapeutic approach has boosted the search for robust biomarkers for patient stratification as responder or non-responder to anti-VEGF therapies.This chapter presents a detailed protocol to perform chromogenic VEGF-A mRNA detection and quantification in human tumor bioptic specimens using RNAscope technology and RNA-in situ hybridization (ISH) algorithm. RNAscope for VEGF-A detection, even for small amounts, is compatible with precious clinical samples and diagnostic laboratory workflows.
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