Blue Native PAGE Analysis of Bacterial Secretion Complexes

分泌物 跨膜蛋白 聚丙烯酰胺凝胶电泳 化学 膜蛋白 功能(生物学) 质谱法 生物化学 基质(水族馆) 三型分泌系统 凝胶电泳 生物 细胞生物学 色谱法 毒力 生态学 受体 基因
作者
Susann Zilkenat,Eun‐jin Kim,Tobias Dietsche,Julia Monjarás Feria,Claudia E. Torres‐Vargas,Mehari Tesfazgi Mebrhatu,Samuel Wagner
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 331-362
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-3445-5_22
摘要

Bacterial protein secretion systems serve to translocate substrate proteins across up to three biological membranes, a task accomplished by hydrophobic, membrane-spanning macromolecular complexes. The overexpression, purification, and biochemical characterization of these complexes is often difficult, thus impeding progress in understading structure and function of these systems. Blue native (BN) polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) allows for the investigation of these transmembrane complexes right from their originating membranes, without the need of long preparative steps, and is amenable to the parallel characterization of a number of samples under near-native conditions. Here, we present protocols for sample preparation, one-dimensional BN PAGE and two-dimensional BN/SDS PAGE, as well as for downstream analysis by staining, immunoblotting, and mass spectrometry on the example of the type III secretion system encoded on Salmonella pathogenicity island 1.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
PDF的下载单位、IP信息已删除 (2025-6-4)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
ruochenzu发布了新的文献求助10
2秒前
大葱鸭发布了新的文献求助10
2秒前
ABC完成签到,获得积分20
4秒前
原本发布了新的文献求助10
4秒前
dzy完成签到,获得积分20
5秒前
amber完成签到 ,获得积分10
5秒前
Green完成签到,获得积分10
7秒前
8秒前
小木子完成签到,获得积分10
10秒前
舟遥遥完成签到,获得积分10
11秒前
华仔应助大橙子采纳,获得10
13秒前
桐桐应助Bismarck采纳,获得10
17秒前
CLY完成签到,获得积分10
18秒前
19秒前
rita_sun1969完成签到,获得积分10
20秒前
研友_8K2QJZ完成签到,获得积分10
20秒前
蝴蝶完成签到 ,获得积分10
21秒前
ARIA完成签到 ,获得积分10
21秒前
大橙子发布了新的文献求助10
24秒前
Bismarck完成签到,获得积分20
25秒前
25秒前
爱笑子默完成签到,获得积分10
26秒前
26秒前
一点完成签到,获得积分10
28秒前
研友_VZG7GZ应助大葱鸭采纳,获得10
28秒前
DezhaoWang完成签到,获得积分10
29秒前
知犯何逆发布了新的文献求助10
30秒前
原本完成签到,获得积分10
30秒前
Bismarck发布了新的文献求助10
31秒前
苗条丹南完成签到 ,获得积分10
33秒前
yu完成签到 ,获得积分10
36秒前
skyleon完成签到,获得积分10
36秒前
无心的天真完成签到 ,获得积分10
37秒前
Engen完成签到,获得积分20
37秒前
38秒前
学术小垃圾完成签到,获得积分10
38秒前
dreamwalk完成签到 ,获得积分10
38秒前
黄淮科研小白龙完成签到 ,获得积分10
39秒前
齐嫒琳完成签到,获得积分10
41秒前
研友_Lav0Qn完成签到,获得积分10
41秒前
高分求助中
【提示信息,请勿应助】关于scihub 10000
Les Mantodea de Guyane: Insecta, Polyneoptera [The Mantids of French Guiana] 3000
徐淮辽南地区新元古代叠层石及生物地层 3000
The Mother of All Tableaux: Order, Equivalence, and Geometry in the Large-scale Structure of Optimality Theory 3000
Handbook of Industrial Diamonds.Vol2 1100
Global Eyelash Assessment scale (GEA) 1000
Picture Books with Same-sex Parented Families: Unintentional Censorship 550
热门求助领域 (近24小时)
化学 材料科学 医学 生物 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 遗传学 基因 物理化学 催化作用 冶金 细胞生物学 免疫学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 4038157
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 3575869
关于积分的说明 11373842
捐赠科研通 3305650
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1819255
邀请新用户注册赠送积分活动 892655
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 815022