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Sensitive detection of viable salmonella bacteria based on tertiary cascade signal amplification via splintR ligase ligation-PCR amplification-CRISPR/Cas12a cleavage

沙门氏菌 清脆的 化学 细菌 聚合酶链反应 微生物学 质粒 DNA连接酶 连接酶连锁反应 分子生物学 生物 DNA 多重聚合酶链反应 基因 遗传学 生物化学
作者
Changyu Zhou,Wenjing Li,Yu Zhao,Kui Gu,Ziwei Liao,Boyan Guo,Zheren Huang,Ming Yang,Hongcheng Wei,Peng Ma,Chao Li,Hao Li,Yizhi Tang,Changwei Lei,Hongning Wang
出处
期刊:Analytica Chimica Acta [Elsevier]
卷期号:1248: 340885-340885 被引量:14
标识
DOI:10.1016/j.aca.2023.340885
摘要

Several viable Salmonella bacteria are capable of causing severe human diseases and huge economic losses. In this regard, viable Salmonella bacteria detection techniques that can identify small numbers of microbial cells are highly valuable. Here, we present a detection method (referred to as SPC) based on the amplification of tertiary signals using splintR ligase ligation, PCR amplification and CRISPR/Cas12a cleavage. The detection limit of the SPC assay was 6 copies (HilA RNA) and 10 CFU (cell). Based on Intracellular HilA RNA detection, this assay can be used to distinguish between viable and dead Salmonella. In addition, it is able to detect multiple serotypes of Salmonella and has been successfully used to detect Salmonella in milk or isolated from farms. Overall, this assay is a promising test for viable pathogens detection and biosafety control.
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