Unraveling O-Glycan Diversity of Mucins: Insights from SmE Mucinase and Ultraviolet Photodissociation Mass Spectrometry

化学 糖基化 粘蛋白 聚糖 糖蛋白 串联质谱法 生物化学 蛋白质组学 蛋白质组 质谱法 计算生物学 生物 基因 色谱法
作者
Amanda Helms,Vincent Chang,Stacy A. Malaker,Jennifer S. Brodbelt
出处
期刊:Analytical Chemistry [American Chemical Society]
标识
DOI:10.1021/acs.analchem.4c02011
摘要

Deciphering the pattern and abundance of O-glycosylation of mucin domain proteins, glycoproteins heavily implicated in cancer and other diseases, remains an ongoing challenge. Both the macro- and microheterogeneity of glycosylation complicates the analysis, motivating the development of new strategies for structural characterization of this diverse class of glycoproteins. Here we combine digestion of mucin domain proteins using a targeted protease, Enhancin from Serratia marcescens (SmE), with ultraviolet photodissociation (UVPD) mass spectrometry to advance glycan mapping and elucidation of O-glycosylation trends of densely glycosylated mucin proteins. UVPD facilitates identification of O-glycoforms of mucin domain proteins TIM-1, MUC-1 and MUC-16. Additionally, UVPD elucidates several glycoforms of MUC-16 and contributes to the discovery of O-glycosylation across tandem repeats of MUC-1.
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