DNA Meets Protein─Development, Characterization, and Application of Aptamers against Peanut Allergen

过敏原 适体 化学 抗体 免疫分析 表面等离子共振 过敏 分子生物学 生物 免疫学 纳米技术 材料科学 纳米颗粒
作者
Laura Schäfer,Csaba Miskey,Sascha Hein,Elke Völker,Andreas Reuter,Kirsten Beyer,Birgit Ahrens,Günter Mayer,Thomas Holzhauser
出处
期刊:Journal of Agricultural and Food Chemistry [American Chemical Society]
卷期号:72 (32): 18225-18233 被引量:1
标识
DOI:10.1021/acs.jafc.4c03948
摘要

Allergen detection methods support food labeling and quality assessment at the allergen component level of allergen preparations used for allergy diagnosis and immunotherapy (AIT). Commonly applied enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) requires animal antibodies but potentially shows batch variations. We developed synthetic aptamers as alternative binders in allergen detection to meet the replacement, reduction, and refinement (3R) principle on animal protection in science. ssDNA aptamers were specifically selected against the major peanut allergen Ara h 1 and identified by next-generation sequencing. Application in various detection systems (ELISA-like assays, western blot, and surface plasmon resonance) was demonstrated. The ELISA-like assay comprised a sensitivity of 10 ng/mL Ara h 1, comparable to published antibody-based ELISA, and allowed Ara h 1 detection in various peanut flours, similar to those used in peanut AIT as well as in processed food. This ELISA-like aptamer-based assay proofs antibody-free allergen detection for food labeling or quality assessment of diagnostic and therapeutic allergen products.
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