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Advanced transfection with Lipofectamine 2000 reagent: primary neurons, siRNA, and high-throughput applications

脂质体 转染 阳离子脂质体 脂质体 原电池 分子生物学 细胞生物学 活力测定 细胞培养 生物 细胞 化学 DNA 生物化学 基因 载体(分子生物学) 遗传学 重组DNA
作者
Brian Dalby
出处
期刊:Methods [Elsevier]
卷期号:33 (2): 95-103 被引量:611
标识
DOI:10.1016/j.ymeth.2003.11.023
摘要

Lipofectamine 2000 is a cationic liposome based reagent that provides high transfection efficiency and high levels of transgene expression in a range of mammalian cell types in vitro using a simple protocol. Optimum transfection efficiency and subsequent cell viability depend on a number of experimental variables such as cell density, liposome and DNA concentrations, liposome-DNA complexing time, and the presence or absence of media components such as antibiotics and serum. The importance of these factors in Lipofectamine 2000 mediated transfection will be discussed together with some specific applications: transfection of primary neurons, high throughput transfection, and delivery of small interfering RNAs.
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