Transcriptional regulation of the small GTPase RhoB gene by TGFß‐induced signaling pathways

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作者
Eleftheria Vasilaki,Elsa Papadimitriou,Virginia Tajadura,Anne J. Ridley,Christos Stournaras,Dimitris Kardassis
出处
期刊:The FASEB Journal [Wiley]
卷期号:24 (3): 891-905 被引量:48
标识
DOI:10.1096/fj.09-134742
摘要

The purpose of the present study was to investigate the mechanism of transcriptional induction of the small GTPase RhoB gene by the transforming growth factor β (TGFß) signaling pathway and the role of this regulation in TGFß-induced cell migration. To achieve our goals, we utilized a combination of siRNAmediated gene silencing, adenovirus-mediated gene transfer receptor and MAPK inhibition, transactivation assays, and DNA-protein interaction assays in human HaCaT keratinocytes. We found that the RhoB gene is a direct transcriptional target of TGFß. We show that TGFß activates an early MEK/ERK pathway and that this activation is required for the recruitment of Smad3 to a novel, nonclassical, Smad binding element in the proximal RhoB promoter, in a p53-dependent manner. This element is overlapping with a CCAAT box that constitutively binds nuclear factor Y. Mutagenesis of this site abolished the Smad-mediated transactivation of the RhoB promoter. Finally, silencing of RhoB gene expression via siRNA or utilization of a dominant negative form of RhoB significantly inhibited TGFß-induced migration of HaCaT keratinocytes and DU145 prostate cancer cells. Our findings establish RhoB as a direct transcriptional target of TGFß in human keratinocytes and identify an important role of RhoB in TGFß-induced cell migration.—Vasilaki, E., Papadimitriou, E., Tajadura, V., Ridley, A. J., Stournaras, C., Kardassis, D. Transcriptional regulation of the small GTPase RhoB gene by TGFß-induced signaling pathways. FASEB J. 24, 891–905 (2010). www.fasebj.org

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