A GPC3-targeting Bispecific Antibody, GPC3-S-Fab, with Potent Cytotoxicity

双特异性抗体 抗体 化学 免疫球蛋白Fab片段 表位 细胞毒性 重组DNA 分子生物学 CD16 免疫系统 计算生物学 单克隆抗体 生物 免疫学 生物化学 互补决定区 CD3型 体外 CD8型 基因
作者
Yanlan Wang,Jiayu Liu,Haitao Pan,Jieyu Xing,Xiaoqiong Wu,Qing Li,Zhong Wang
出处
期刊:Journal of Visualized Experiments [MyJoVE Corporation]
卷期号: (137) 被引量:7
标识
DOI:10.3791/57588
摘要

This protocol describes the construction and functional studies of a bispecific antibody (bsAb), GPC3-S-Fab. bsAbs can recognize two different epitopes through their two different arms. bsAbs have been actively studied for their ability to directly recruit immune cells to kill tumor cells. Currently, the majority of bsAbs are produced in the form of recombinant proteins, either as Fc-containing bsAbs or as smaller bsAb derivatives without the Fc region. In this study, GPC3-S-Fab, an antibody fragment (Fab) based bispecific antibody, was designed by linking the Fab of anti-GPC3 antibody GC33 with an anti-CD16 single domain antibody. The GPC3-S-Fab can be expressed in Escherichia coli and purified by two affinity chromatographies. The purified GPC3-S-Fab can specifically bind to and kill GPC3 positive liver cancer cells by recruiting natural killer cells, suggesting a potential application of GPC3-S-Fab in liver cancer therapy.
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