黄芪-莪术联合顺铂诱导肝癌细胞凋亡及其对miR-122a,miR-221,miR-151表达的影响

目的：探讨黄芪-莪术联合顺铂（DDP）抗肝癌的作用机制。方法：构建人肝癌裸鼠原位移植瘤模型。成瘤后,将其随机分为模型组、顺铂组（DDP,2 mg·kg^-1,ip）,黄芪-莪术高、中、低剂量（H,M,L,12,6,3 g·kg^-1·d^-1,ig）组,黄芪-莪术高剂量＋顺铂组（H＋DDP）,黄芪-莪术中剂量＋顺铂组（M＋DDP）,黄芪-莪术低剂量＋顺铂组（L＋DDP）,每组8只。采用Td Tmediated d UTP nick end labeling（TUNEL）法观察黄芪-莪术联合顺铂对人肝癌细胞Hep G2的原位诱导凋亡作用,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其对凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）的影响,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）观察人肝癌裸鼠肿瘤组织中microRNA（miR）-122a,miR-221,miR-151的表达。结果：H,H＋DDP,M＋DDP,L＋DDP组均有肿瘤细胞凋亡,镜下观察肿瘤细胞核内呈棕黄色,核高度凝聚,部分细胞脱落,与模型组比较有明显的凋亡现象发生（P〈0.05,P〈0.01）,以H＋DDP组诱导凋亡作用最为显著。与模型组比较,H,M,H＋DDP,M＋DDP,L＋DDP组血清中Bcl-2含量均显著降低（P〈0.01）,以H＋DDP组降低最为显著。与DDP组比较,H,M,L,H＋DDP,M＋DDP,L＋DDP均能显著上调miR-122a的表达（P〈0.01）,H＋DDP对miR-221,miR-151的表达有显著抑制作用（P〈0.01）。结论：黄芪-莪术能显著诱导人肝癌细胞Hep G2凋亡,且诱导凋亡作用与剂量有一定的正相关性,其机制可能与显著下调Bcl-2表达,上调miR-122a,下调miR-221,miR-151的表达有关,与DDP合用表现为协同增效作用。