Chemical-regulated, site-specific DNA excision in transgenic plants

生物 转基因 可选择标记 拟南芥 交易激励 转化(遗传学) Cre重组酶 分子生物学 绿色荧光蛋白 融合基因 Cre-Lox重组 报告基因 基因 位点特异性重组 DNA 重组酶 细胞生物学 遗传学 基因表达 转基因小鼠 突变体 重组
作者
Jianru Zuo,Qi-Wen Niu,Simon Geir Møller,Nam‐Hai Chua
出处
期刊:Nature Biotechnology [Springer Nature]
卷期号:19 (2): 157-161 被引量:319
标识
DOI:10.1038/84428
摘要

We have developed a chemical-inducible, site-specific DNA excision system in transgenic Arabidopsis plants mediated by the Cre/loxP DNA recombination system. Expression of the Cre recombinase was tightly controlled by an estrogen receptor-based fusion transactivator XVE. Upon induction by β-estradiol, sequences encoding the selectable marker, Cre, and XVE sandwiched by two loxP sites were excised from the Arabidopsis genome, leading to activation of the downstream GFP (green fluorescent protein) reporter gene. Genetic and molecular analyses indicated that the system is tightly controlled, showing high-efficiency inducible DNA excision in all 19 transgenic events tested with either single or multiple T-DNA insertions. The system provides a highly reliable method to generate marker-free transgenic plants after transformation through either organogenesis or somatic embryogenesis.
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