Efficient non-viral transfection of THP-1 cells

THP1细胞系 转染 核转染 单核细胞白血病 细胞培养 细胞生物学 单核细胞 生物 巨噬细胞 免疫系统 活力测定 细胞分化 电池类型 分子生物学 细胞 免疫学 体外 生物化学 基因 遗传学
作者
Michael Schnoor,Insa Buers,Anika Sietmann,Martin F. Brodde,Oliver Hofnagel,Horst Robenek,Stefan Lorkowski
出处
期刊:Journal of Immunological Methods [Elsevier]
卷期号:344 (2): 109-115 被引量:64
标识
DOI:10.1016/j.jim.2009.03.014
摘要

Macrophages are an important part of the cellular immune system and play a key role during immune responses. Thus, macrophages are interesting targets in basic and clinical research. Primary monocytes or monocyte-derived macrophages do not proliferate on a suitable scale so that their use for functional studies in vitro is limited. Immortal proliferating cell lines, such as the human THP-1 monocytic leukemia cell line, are therefore often used instead of primary cells. Transfection is a useful tool to study the function of gene products, but transfection of THP-1 monocytes and pre-differentiated THP-1 macrophages with subsequent differentiation into mature THP-1 macrophages using phorbol esters is usually accompanied by a progressive loss of cell viability. In this study, we describe a simple and rapid approach for efficient transfection of THP-1 monocytes and pre-differentiated THP-1 macrophages using a modified Nucleofection-based approach. The protocol maintains cell viability and functionality, thus allowing efficient transfection of THP-1 cells combined with subsequent differentiation of transfected THP-1 cells into mature macrophages.
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