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A Rapid RPA-CRISPR/Cas12a Detection Method for Adulteration of Goat Milk Powder

清脆的 重组酶聚合酶扩增 食品科学 牛乳 生物 生物技术 聚合酶链反应 色谱法 化学 基因 遗传学
作者
Shuqin Huang,Yan Liu,Xu Zhang,Zuoqi Gai,Hongtao Lei,Xing Shen
出处
期刊:Foods [MDPI AG]
卷期号:12 (8): 1569-1569 被引量:14
标识
DOI:10.3390/foods12081569
摘要

Because of the serious adulteration of goat milk, the rapid on-site detection of goat milk powder adulteration is needed. In this study, the CRISPR/Cas12a detection system combined with recombinase polymerase amplification (RPA) was employed to qualitatively detect the adulteration of goat milk powder with cattle-derived components. Specific primers and crRNA were designed and screened. After the optimization of RPA and the Cas system, the RPA-CRISPR/Cas12a detection method was established. The detection can complete the rapid identification of cattle-derived components in 45 min, without the assistant of large equipment. The absolute detectability of the RPA-CRISPR/Cas12a assay could reach 10−2 ng/μL for cattle genomic DNA, and 1% (w/w) for cattle milk powder, which is suitable to meet the testing requirements for on-site detection. In total, 55 commercial goat milk powder products were collected for blind testing. The results showed that 27.3% of the samples were adulterated with cattle ingredients, revealing a serious adulteration situation in goat milk powder market. The RPA-CRISPR/Cas12a assay established in this research exhibited its potential for practical use of on-site detection to detect cow milk powder in goat milk powder and can provide reliable technical reference for combating food fraud of adulteration of goat milk products.
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