In Situ Protein Binding Assay Using Fc-Fusion Proteins

离解常数 免疫沉淀 融合蛋白 化学 配体结合分析 重组DNA 原位 分子生物学 蛋白质-蛋白质相互作用 细胞生物学 生物物理学 计算生物学 生物化学 生物 受体 基因 有机化学
作者
Nirmala Padmanabhan,Tabrez J. Siddiqui
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:: 83-91 被引量:1
标识
DOI:10.1007/978-1-4939-6688-2_7
摘要

This protocol describes an in situ protein-protein interaction assay between tagged recombinant proteins and cell-surface expressed synaptic proteins. The assay is arguably more sensitive than other traditional protein binding assays such as co-immunoprecipitation and pull-downs and provides a visual readout for binding. This assay has been widely used to determine the dissociation constant of binding of trans-synaptic adhesion proteins. The step-wise description in the protocol should facilitate the adoption of this method in other laboratories.

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