Lentivirus Production and Purification

质粒 转染 转基因 生物 效价 基因传递 载体(分子生物学) HEK 293细胞 基因组 体外 病毒载体 基因转移 慢病毒 遗传增强 基因 计算生物学 病毒 重组DNA 细胞生物学 病毒学 遗传学 病毒性疾病
作者
Matthew J. Benskey,Fredric P. Manfredsson
出处
期刊:Methods in molecular biology 卷期号:: 107-114 被引量:48
标识
DOI:10.1007/978-1-4939-3271-9_8
摘要

Lentiviral (LV) vectors offer unique advantages over other gene delivery systems, namely the ability to integrate transgenes into the genome of both dividing and nondividing cells. Detailed herein is a simple protocol for the production LV vectors, describing the triple transfection of an LV transfer vector and LV helper plasmids into HEK-293 cells, and the subsequent purification of virions from the cellular media. The current protocol is versatile, and can be easily modified to fit the specific needs of the researcher in order to produce relatively high-titer LV vectors which can be used to transduce a wide variety of cells both in vitro and in vivo.
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