Generation, expansion and functional analysis of endothelial cells and pericytes derived from human pluripotent stem cells

诱导多能干细胞 斑马鱼 细胞生物学 生物 干细胞 内皮干细胞 再生(生物学) 周细胞 电池类型 胚胎干细胞 细胞 体外 遗传学 基因
作者
Valeria V. Orlova,Francijna E. van den Hil,Sandra Petrus‐Reurer,Yvette Drabsch,Peter ten Dijke,Christine L. Mummery
出处
期刊:Nature Protocols [Nature Portfolio]
卷期号:9 (6): 1514-1531 被引量:302
标识
DOI:10.1038/nprot.2014.102
摘要

The authors of this Protocol describe how to generate endothelial cells and pericytes and how to functionally evaluate the cells' ability to generate primary vascular plexus and incorporate it into the zebrafish vasculature. Human endothelial cells (ECs) and pericytes are of great interest for research on vascular development and disease, as well as for future therapy. This protocol describes the efficient generation of ECs and pericytes from human pluripotent stem cells (hPSCs) under defined conditions. Essential steps for hPSC culture, differentiation, isolation and functional characterization of ECs and pericytes are described. Substantial numbers of both cell types can be derived in only 2–3 weeks: this involves differentiation (10 d), isolation (1 d) and 4 or 10 d of expansion of ECs and pericytes, respectively. We also describe two assays for functional evaluation of hPSC-derived ECs: (i) primary vascular plexus formation upon coculture with hPSC-derived pericytes and (ii) incorporation in the vasculature of zebrafish xenografts in vivo. These assays can be used to test the quality and drug sensitivity of hPSC-derived ECs and model vascular diseases with patient-derived hPSCs.
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