Different Approaches to Record Human Sperm Exocytosis

胞吐 顶体反应 精子 透明带 顶体 细胞生物学 人类受精 共焦显微镜 流式细胞术 荧光显微镜 化学 生物 分泌物 解剖 免疫学 物理 卵母细胞 光学 荧光 生物化学 遗传学 胚胎
作者
Laila Suhaiman,Karina Noel Altamirano,Alfonsina Morales,Silvina Belmonte
出处
期刊:Methods in molecular biology 卷期号:: 139-168 被引量:2
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-1044-2_10
摘要

AbstractAcrosome reaction is an exocytic process that enables a sperm to penetrate the zona pellucida and fertilize an egg. The process involves the fenestration and vesiculation of the sperm plasma membrane and outer acrosomal membrane, releasing the acrosomal content. Given the importance of the acrosome secretion in fertilization, many different methods have been developed to detect the acrosome reaction of sperm. In this chapter, we describe detailed practical procedures to assess the acrosomal status of human spermatozoa. To do this, we resorted to light optical and epifluorescence microscopy, flow cytometry, and transmission electron microscopy. We also itemize the protocol for real-time measurements of the acrosome reaction by confocal microscopy. Further, we discuss the level of complexity, costs, and the reasons why a researcher should choose each technique.This chapter is designed to provide the user with sufficient background to measure acrosomal exocytosis in human sperm.Key wordsAcrosome exocytosisHuman spermAcrosome reactionRecording sperm secretion

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