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Electrophoresis of DNA in agarose gels, polyacrylamide gels and in free solution

聚丙烯酰胺 琼脂糖 颜色标记 电泳 核酸凝胶电泳 DNA 色谱法 化学 聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质凝胶电泳 高分子化学 生物化学
作者
Nancy C. Stellwagen
出处
期刊:Electrophoresis [Wiley]
卷期号:30 (S1) 被引量:172
标识
DOI:10.1002/elps.200900052
摘要

Abstract This review describes the electrophoresis of curved and normal DNA molecules in agarose gels, polyacrylamide gels and in free solution. These studies were undertaken to clarify why curved DNA molecules migrate anomalously slowly in polyacrylamide gels but not in agarose gels. Two milestone papers are cited, in which Ferguson plots were used to estimate the effective pore size of agarose and polyacrylamide gels. Subsequent studies on the effect of the electric field on agarose and polyacrylamide gel matrices, DNA interactions with the two gel matrices, and the effect of curvature on the free solution mobility of DNA are also described. The combined results suggest that the anomalously slow mobilities observed for curved DNA molecules in polyacrylamide gels are primarily due to preferential interactions of curved DNAs with the polyacrylamide gel matrix; the restrictive pore size of the matrix is of lesser importance. In free solution, DNA mobilities increase with increasing molecular mass until leveling off at a plateau value of (3.17±0.01)×10 −4 cm 2 /V s in 40 mM Tris‐acetate‐EDTA buffer at 20°C. Curved DNA molecules migrate anomalously slowly in free solution as well as in polyacrylamide gels, explaining why the Ferguson plots of curved and normal DNAs containing the same number of base pairs extrapolate to different mobilities at zero gel concentration.
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