清晨好,您是今天最早来到科研通的研友!由于当前在线用户较少,发布求助请尽量完整的填写文献信息,科研通机器人24小时在线,伴您科研之路漫漫前行!

In vitro affinity maturation of human GM-CSF antibodies by targeted CDR-diversification

抗体 亲和力成熟 细胞因子 生物 受体 体外 体细胞突变 免疫系统 免疫学 分子生物学 细胞生物学 B细胞 生物化学
作者
Stefan Steidl,Olaf Ratsch,Bodo Brocks,Manuela Dürr,Elisabeth Thomassen-Wolf
出处
期刊:Molecular Immunology [Elsevier]
卷期号:46 (1): 135-144 被引量:85
标识
DOI:10.1016/j.molimm.2008.07.013
摘要

The mammalian immune system applies somatic hypermutation to select for antibodies with improved dissociation rates in vivo up to an intrinsic limit, previously termed as affinity ceiling. However, for certain therapeutic applications it may be desirable to further improve antibody affinities beyond that limit. In this study the selection of antibodies specific for the pro-inflammatory cytokine granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) from the HuCAL GOLD human antibody library is described. In order to increase affinity and also functional activity, in vitro affinity maturation of a pool of lead Fab candidates was carried out. CDR-L3 and parallel CDR-H2 diversification using trinucleotide consensus cassettes were followed by the combination of optimized CDR-L3 and CDR-H2 leading to a 5000-fold improved affinity finally reaching a KD of 400 fM. Cytokine neutralizing potential of MOR04357 was evaluated in a TF-1 proliferation assay. Along with affinity optimization a 2000-fold increase in potency was observed compared to the parental antibody. Due to species cross-reactivity MOR04357 also blocks rat GM-CSF induced proliferation of FDCP-1 cells. Receptor inhibition studies showed that MOR04357 prevents the interaction of GM-CSF with the GM-CSF receptor alpha chain. As a consequence this leads to a blockade in signal transduction as measured by abolished STAT5 phosphorylation in the presence of GM-CSF and antibody. Due to its pro-inflammatory role GM-CSF has been implicated in the pathophysiology of inflammatory diseases like rheumatoid arthritis or asthma. Based on the mode of action described herein MOR04357 shows favourable antibody features as a potential drug candidate.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
爱坤坤发布了新的文献求助20
40秒前
tienslord完成签到,获得积分10
58秒前
科研发发发完成签到 ,获得积分10
1分钟前
1分钟前
qcck发布了新的文献求助10
1分钟前
qcck完成签到,获得积分10
2分钟前
Lim冬青完成签到,获得积分10
2分钟前
qmln4完成签到,获得积分20
2分钟前
更深的蓝发布了新的文献求助50
3分钟前
星辰大海应助科研通管家采纳,获得10
3分钟前
wyx完成签到,获得积分10
3分钟前
4分钟前
更深的蓝完成签到,获得积分10
4分钟前
ranj完成签到,获得积分10
4分钟前
打打应助我要去上学采纳,获得10
5分钟前
5分钟前
5分钟前
飞快的冷亦完成签到,获得积分10
5分钟前
5分钟前
赘婿应助飞快的冷亦采纳,获得10
5分钟前
5分钟前
CCC完成签到 ,获得积分10
6分钟前
6分钟前
6分钟前
今后应助dormraider采纳,获得10
6分钟前
俊逸吐司完成签到 ,获得积分10
7分钟前
7分钟前
Gab_bb应助ZY采纳,获得10
7分钟前
宇文非笑完成签到 ,获得积分10
7分钟前
oscar完成签到,获得积分10
7分钟前
8分钟前
8分钟前
迷茫的一代完成签到,获得积分10
8分钟前
小聖完成签到 ,获得积分10
8分钟前
liuzhifenshen完成签到,获得积分10
8分钟前
8分钟前
9分钟前
酷波er应助我要去上学采纳,获得10
9分钟前
10分钟前
11分钟前
高分求助中
Spray / Wall-interaction Modelling by Dimensionless Data Analysis 2000
ALA生合成不全マウスでの糖代謝異常の分子機構解析 520
安全防范技术与工程 500
Mathematics and Finite Element Discretizations of Incompressible Navier—Stokes Flows 500
2024 Medicinal Chemistry Reviews 400
Актуализированная стратиграфическая схема триасовых отложений Прикаспийского региона. Объяснительная записка 360
Dictionary of socialism 350
热门求助领域 (近24小时)
化学 医学 生物 材料科学 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 基因 遗传学 催化作用 物理化学 免疫学 量子力学 细胞生物学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3192671
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2841682
关于积分的说明 8034526
捐赠科研通 2505389
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1338533
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 638361
邀请新用户注册赠送积分活动 606923