In vitro affinity maturation of human GM-CSF antibodies by targeted CDR-diversification

抗体 亲和力成熟 细胞因子 生物 受体 体外 体细胞突变 免疫系统 免疫学 分子生物学 细胞生物学 B细胞 生物化学
作者
Stefan Steidl,Olaf Ratsch,Bodo Brocks,Manuela Dürr,Elisabeth Thomassen-Wolf
出处
期刊:Molecular Immunology [Elsevier]
卷期号:46 (1): 135-144 被引量:85
标识
DOI:10.1016/j.molimm.2008.07.013
摘要

The mammalian immune system applies somatic hypermutation to select for antibodies with improved dissociation rates in vivo up to an intrinsic limit, previously termed as affinity ceiling. However, for certain therapeutic applications it may be desirable to further improve antibody affinities beyond that limit. In this study the selection of antibodies specific for the pro-inflammatory cytokine granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) from the HuCAL GOLD human antibody library is described. In order to increase affinity and also functional activity, in vitro affinity maturation of a pool of lead Fab candidates was carried out. CDR-L3 and parallel CDR-H2 diversification using trinucleotide consensus cassettes were followed by the combination of optimized CDR-L3 and CDR-H2 leading to a 5000-fold improved affinity finally reaching a KD of 400 fM. Cytokine neutralizing potential of MOR04357 was evaluated in a TF-1 proliferation assay. Along with affinity optimization a 2000-fold increase in potency was observed compared to the parental antibody. Due to species cross-reactivity MOR04357 also blocks rat GM-CSF induced proliferation of FDCP-1 cells. Receptor inhibition studies showed that MOR04357 prevents the interaction of GM-CSF with the GM-CSF receptor alpha chain. As a consequence this leads to a blockade in signal transduction as measured by abolished STAT5 phosphorylation in the presence of GM-CSF and antibody. Due to its pro-inflammatory role GM-CSF has been implicated in the pathophysiology of inflammatory diseases like rheumatoid arthritis or asthma. Based on the mode of action described herein MOR04357 shows favourable antibody features as a potential drug candidate.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
Yyy完成签到 ,获得积分10
刚刚
帅仁123发布了新的文献求助10
刚刚
奋斗的年纪完成签到 ,获得积分10
刚刚
azhu完成签到 ,获得积分10
刚刚
小玲仔完成签到 ,获得积分10
2秒前
晓恬完成签到,获得积分10
3秒前
深情安青应助木头采纳,获得10
5秒前
共享精神应助KK采纳,获得10
6秒前
蒋海完成签到 ,获得积分10
8秒前
帅仁123完成签到,获得积分10
8秒前
9秒前
摸鱼校尉完成签到,获得积分10
10秒前
qq应助黑暗精灵采纳,获得10
10秒前
丘比特应助benny279采纳,获得10
11秒前
文献缺缺完成签到,获得积分10
12秒前
labordoc完成签到,获得积分10
13秒前
任无施发布了新的文献求助10
14秒前
1820801018完成签到,获得积分10
15秒前
15秒前
锵锵锵完成签到 ,获得积分10
16秒前
朴素易梦完成签到 ,获得积分10
16秒前
en发布了新的文献求助10
18秒前
Zurlliant完成签到,获得积分10
18秒前
徐昊完成签到,获得积分10
20秒前
赘婿应助聂难敌采纳,获得50
21秒前
23秒前
dwct完成签到,获得积分20
25秒前
树袋熊发布了新的文献求助100
25秒前
hyde完成签到,获得积分10
27秒前
KK发布了新的文献求助10
27秒前
爱你的心满满完成签到 ,获得积分10
28秒前
斯文败类应助文静醉易采纳,获得10
29秒前
糊涂的语兰完成签到,获得积分10
29秒前
September完成签到 ,获得积分10
30秒前
刘刘完成签到,获得积分10
31秒前
32秒前
英姑应助Luobing采纳,获得10
32秒前
remohu完成签到,获得积分10
33秒前
林家小弟完成签到,获得积分10
33秒前
圆圆的分子球完成签到 ,获得积分10
34秒前
高分求助中
Spray / Wall-interaction Modelling by Dimensionless Data Analysis 2000
Evolution 3rd edition 1500
保险藏宝图 1000
Mantiden: Faszinierende Lauerjäger Faszinierende Lauerjäger 700
PraxisRatgeber: Mantiden: Faszinierende Lauerjäger 700
Mathematics and Finite Element Discretizations of Incompressible Navier—Stokes Flows 500
A new species of Coccus (Homoptera: Coccoidea) from Malawi 500
热门求助领域 (近24小时)
化学 医学 生物 材料科学 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 基因 遗传学 催化作用 物理化学 免疫学 量子力学 细胞生物学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3187075
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2837033
关于积分的说明 8012502
捐赠科研通 2499469
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1334449
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 637194
邀请新用户注册赠送积分活动 605075