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Isolation and Purification of Viable PGCs from Mouse Embryos

生物 单元格排序 胚胎 细胞生物学 胚胎干细胞 生殖细胞 精子 遗传学 分子生物学 男科 细胞 基因 医学
作者
Massimo De Felici
出处
期刊:Methods in molecular biology [Springer Science+Business Media]
卷期号:2770: 3-13
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-3698-5_1
摘要

In all organisms with sexual reproduction, sperm and oocytes derive from embryonic precursors termed primordial germ cells (PGCs) which pass on genetic information to subsequent generations. Studies aimed to unravel PGC development at molecular level in mammals can be traced at the early 1980s and were hampered by the difficulty in obtaining both sufficient quantities and purity of PGCs. For many laboratories, the isolation and purification methods of PGCs at different stages from embryos are the most shortcut and affordable tool to study many aspects of their development at cellular and molecular levels. In the present chapter, I focus on immunomagnetic cell sorting (MACS) and fluorescence-activated cell sorting (FACS) methods used in my laboratory for the purification of mouse PGCs from 10.5 to 12.5 dpc embryos before their differentiation in oogonia/oocytes in female and prospermatogonia in male.
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