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A turn on fluorescent assay for real time determination of β-galactosidase and its application in living cell imaging

荧光 糖苷键 细胞 化学 生物标志物 衰老 癌细胞 活体细胞成像 细胞生物学 生物物理学 生物化学 检出限 癌症 生物 色谱法 物理 量子力学 遗传学
作者
Dan Liú,Zixuan Zhang,Anying Chen,Peng Zhang
出处
期刊:Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy [Elsevier BV]
卷期号:265: 120345-120345 被引量:8
标识
DOI:10.1016/j.saa.2021.120345
摘要

Abstract In recent years, fluorescent probes based on chemical reactions have been widely investigated as a powerful and noninvasive method for the diagnosis of diseases. β-Galactosidase (β-gal), a typical lysosomal glycosidase, over expressed in senescent cells and primary ovarian cancer cells, which has been considered as an important biomarker cell senescence and primary ovarian cancers. Fluorescent probes for the determination of β-gal provide an excellent choice for visualization of cell senescence. In this work, a turn on fluorescent probe (HBT-gal) for β-gal activity was developed based on the enzymatic hydrolysis of glycosidic bonds. HBT-gal showed little fluorescence in aqueous buffer excited at 415 nm, while emitted green fluorescence centered at ∼ 492 nm upon incubated with β-gal. The sensing scheme showed high selectivity and sensitivity for β-gal activity with a limit of detection calculated as low as 0.19 mU/mL. Moreover, HBT-gal was successfully applied to image β-gal activity in senescent Hep G2 cells treated with H2O2. Therefore, probe HBT-gal demonstrated a potential usage for the determination of cell senescence using β-gal as a biomarker.
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