Selection and Characterization of Human Anti-MAGE-A1 scFv and Immunotoxin

免疫毒素 单链可变片段 噬菌体展示 抗体 重组DNA 分子生物学 免疫沉淀 化学 免疫印迹 肽库 斑点印迹 亲和层析 人源化抗体 抗原 单克隆抗体 病毒学 生物 生物化学 基因 肽序列 免疫学
作者
Hong Lin,Yuan Mao,Dawei Zhang,Li Hu,Jinrong Qiu,Jin Zhu,Renjie Chen
出处
期刊:Anti-cancer Agents in Medicinal Chemistry [Bentham Science]
卷期号:13 (8): 1259-1266 被引量:11
标识
DOI:10.2174/18715206113139990134
摘要

Melanoma-associated antigen (MAGE) is expressed on the surface of multiple tumor cell types and is a promising target of biotherapeutic drug delivery via the anti-MAGE-A1 antibody. In this study, a human single-chain variable fragment (scFv) antibody phage library was generated and applied to recombinant MAGE-A1-coated immunotubes by phage display technology. The soluble anti- MAGE-A1 scFv was expressed and purified by immobilized metal-chelated affinity chromatography (IMAC). The anti-MAGE-A1 scFv could bind native MAGE-A1 confirmed by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), dot blot, and immunoprecipitation (IP) analysis. The immunotoxin was expressed and purified by IMAC successfully. The results indicated that the human anti-MAGE-A1 immunotoxin could provide a valuable drug for clinic cancer therapy.
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