Nonviral transfection of distinct types of human dendritic cells: high-efficiency gene transfer by electroporation into hematopoietic progenitor- but not monocyte-derived dendritic cells

电穿孔 转染 生物 树突状细胞 分子生物学 抗原 祖细胞 造血 基因传递 细胞毒性T细胞 遗传增强 单核细胞 核转染 细胞生物学 干细胞 细胞培养 免疫学 基因 体外 遗传学
作者
Viggo Van Tendeloo,H-W Snoeck,Filip Lardon,Guido Vanham,Griet Nijs,Marc Lenjou,Lydia Hendriks,Christine Van Broeckhoven,Adriaan C. Moulijn,Inez Rodrigus,Petra Verdonk,DR Van Bockstaele,Zwi Berneman
出处
期刊:Gene Therapy [Springer Nature]
卷期号:5 (5): 700-707 被引量:114
标识
DOI:10.1038/sj.gt.3300626
摘要

Human dendritic cells (DC) are highly professional antigen presenting cells for the priming of naive cytotoxic T cells. Gene transfer in DC would be a useful strategy to load DC with relevant de novo synthesized antigens for immunotherapeutical purposes. As a first step towards a DC-based gene therapy, we examined the efficiency of nonviral transfection in different types of cultured human dendritic cells with a humanized red-shifted green fluorescent protein reporter gene. Plasmid DNA transfection by electroporation or lipofection was used to transfect CD34+ progenitor cell-derived DC (PC-DC) and Langerhans’ cells (PC-LC), as well as monocyte-derived DC (Mo-DC). While lipofection was unsuccessful in all types of DC, we obtained high-efficiency gene transfer by electroporation in PC-LC (16%) and PC-DC (12%). In contrast, electroporation was strikingly less efficient in Mo-DC (⩽2%). The potent allostimulatory capacity of DC was still retained in electroporated PC-DC and PC-LC. In conclusion, electroporation of antigen expressing plasmid DNA is an efficient tool for nonviral gene transfer in PC-DC and PC-LC, but not in Mo-DC and could be useful for the development of DC-based tumor immunotherapy.
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