A rapid boiling method for the preparation of bacterial plasmids

质粒 离心 细菌 色谱法 化学 限制性酶 培养皿 质体制备 基因组DNA 生物 DNA 微生物学 生物化学 PBR322电话 遗传学
作者
David S. Holmes,Michael E. Quigley
出处
期刊:Analytical Biochemistry [Elsevier]
卷期号:114 (1): 193-197 被引量:3314
标识
DOI:10.1016/0003-2697(81)90473-5
摘要

A simple and rapid method for preparing plasmids for restriction enzyme analysis has been developed. Bacteria are boiled for 15–40 s and an insoluble clot of genomic DNA and debris is removed by low-speed centrifugation. Plasmids are recovered from the supernatant by isopropanol precipitation and can be resuspended in buffer and immediately restricted. A 5-ml bacterial culture yields enough plasmids for many restriction enzyme digestions, but a single colony on a petri dish or a 0.5-ml miniculture will suffice for a few experiments. In addition, the procedure can be readily adapted for the preparation of plasmids from liter cultures with quantitative yields.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
1秒前
2秒前
畅快的鱼完成签到,获得积分10
2秒前
NexusExplorer应助自觉若灵采纳,获得30
2秒前
SciGPT应助蠢蠢的死法采纳,获得30
3秒前
Grool发布了新的文献求助10
3秒前
肉肉的小屋完成签到,获得积分10
4秒前
4秒前
姬霓太美完成签到,获得积分10
5秒前
Galaxy发布了新的文献求助10
5秒前
苗条小甜瓜完成签到,获得积分10
6秒前
容荣发布了新的文献求助10
7秒前
7秒前
8秒前
enchanted发布了新的文献求助10
8秒前
唐帅发布了新的文献求助10
8秒前
田田发布了新的文献求助10
10秒前
11秒前
慕青应助花生土豆采纳,获得10
11秒前
Grool完成签到,获得积分10
11秒前
帅哥吴克发布了新的文献求助10
12秒前
容荣完成签到,获得积分10
12秒前
12秒前
14秒前
从容芮应助梅子采纳,获得10
16秒前
科研通AI2S应助梅子采纳,获得10
16秒前
18秒前
20秒前
20秒前
宋宋宋2发布了新的文献求助10
20秒前
22秒前
22秒前
23秒前
汉堡包应助现在毕业采纳,获得10
24秒前
科研通AI2S应助梁漂亮采纳,获得10
24秒前
柒柒发布了新的文献求助10
25秒前
zxiaoo完成签到,获得积分10
26秒前
仙女本仙完成签到,获得积分10
28秒前
777发布了新的文献求助10
29秒前
kryptonite完成签到 ,获得积分10
29秒前
高分求助中
Licensing Deals in Pharmaceuticals 2019-2024 3000
Cognitive Paradigms in Knowledge Organisation 2000
Effect of reactor temperature on FCC yield 2000
Introduction to Spectroscopic Ellipsometry of Thin Film Materials Instrumentation, Data Analysis, and Applications 1800
Natural History of Mantodea 螳螂的自然史 1000
A Photographic Guide to Mantis of China 常见螳螂野外识别手册 800
How Maoism Was Made: Reconstructing China, 1949-1965 800
热门求助领域 (近24小时)
化学 医学 生物 材料科学 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 基因 遗传学 催化作用 物理化学 免疫学 量子力学 细胞生物学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3313740
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2946062
关于积分的说明 8528196
捐赠科研通 2621645
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1434003
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 665112
邀请新用户注册赠送积分活动 650658