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Tyramide signal amplification coupled with multiple immunolabeling and RNAScope in situ hybridization in formaldehyde‐fixed paraffin‐embedded human fetal brain

免疫标记 原位杂交 原位 免疫组织化学 信使核糖核酸 分子生物学 生物 核糖核酸 病理 化学 生物化学 免疫学 基因 医学 有机化学
作者
Ayman Alzu'bi,Niveditha Sankar,Moira Crosier,Janet Kerwin,Gavin J. Clowry
出处
期刊:Journal of Anatomy [Wiley]
标识
DOI:10.1111/joa.13644
摘要

Several strategies have been recently introduced to improve the practicality of multiple immunolabeling and RNA in situ hybridization protocols. Tyramide signal amplification (TSA) is a powerful method used to improve the detection sensitivity of immunohistochemistry. RNAScope is a novel commercially available in situ hybridization assay for the detection of RNA expression. In this work, we describe the use of TSA and RNAScope in situ hybridization as extremely sensitive and specific methods for the evaluation of protein and RNA expression in formaldehyde-fixed paraffin-embedded human fetal brain sections. These two techniques, when properly optimized, were highly compatible with routine formaldehyde-fixed paraffin-embedded tissue that preserves the best morphological characteristics of delicate fetal brain samples, enabling an unparalleled ability to simultaneously visualize the expression of multiple protein and mRNA of genes that are sparsely expressed in the human fetal telencephalon.
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