Recombinant Protein Production from Stable CHO Cell Pools

中国仓鼠卵巢细胞 重组DNA 生产(经济) 化学 生物化学 基因 受体 经济 宏观经济学
作者
Laurence Delafosse,Simon Lord‐Dufour,Alex Pelletier,Sylvie Perret,Alina Burlacu,Manon Ouimet,Brian Cass,Simon Joubert,Matthew Stuible,Yves Durocher
出处
期刊:Methods in molecular biology 卷期号:: 99-121
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-3878-1_7
摘要

The continuous improvement of expression platforms is necessary to respond to the increasing demand for recombinant proteins that are required to carry out structural or functional studies as well as for their characterization as biotherapeutics. While transient gene expression (TGE) in mammalian cells constitutes a rapid and well-established approach, non-clonal stably transfected cells, or "pools," represent another option, which is especially attractive when recurring productions of the same protein are required. From a culture volume of just a few liters, stable pools can provide hundreds of milligrams to gram quantities of high-quality secreted recombinant proteins.In this chapter, we describe a highly efficient and cost-effective procedure for the generation of Chinese Hamster Ovary cell stable pools expressing secreted recombinant proteins using commercially available serum-free media and polyethylenimine (PEI) as the transfection reagent. As a specific example of how this protocol can be applied, the production and downstream purification of recombinant His-tagged trimeric SARS-CoV-2 spike protein ectodomain (SmT1) are described.
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