Oligonucleotide primers for polymerase chain reaction amplification of human immunoglobulin variable genes and design of family‐specific oligonucleotide probes

生物 寡核苷酸 聚合酶链反应 基因 低聚物限制 互补DNA 分子生物学 基因家族 克隆(编程) 遗传学 免疫球蛋白重链 基因组 计算机科学 程序设计语言
作者
James D. Marks,Michael Tristem,Abraham Karpas,Greg Winter
出处
期刊:European Journal of Immunology [Wiley]
卷期号:21 (4): 985-991 被引量:215
标识
DOI:10.1002/eji.1830210419
摘要

Abstract In recent work, the polymerase chain reaction (PCR) has been used to amplify rearranged mouse and human immunoglobulin heavy and χ light chain variable (V) genes. Here we have optimized the design of the PCR primers for human V genes and used them to amplify cDNA from human peripheral blood lymphocytes. Cloning and sequencing revealed a diverse repertoire of V genes, and the presence of members of each human V gene family. After alignment of the sequences, we identified a region conserved within V gene families, but differing between families, and used this to design family‐specific oligonucleotide probes.
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